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    網站首頁 - 技術文章 - 色譜柱可以反沖嗎?

    色譜柱可以反沖嗎?

    更新時間:2022-01-24點擊次數:51次
    色譜柱可以反沖嗎?
       色譜柱可以反沖嗎?色譜柱能不能反沖的問題爭議很大,但在我們工作中,用色譜柱反沖技術修復色譜柱收到柱效提高、柱效恢復的效果。
      液相色譜柱上基本都有->標志,表示流動相的流動方向,有的在色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣,翻譯成“決不能反沖”的意思,但在我們工作中,用色譜柱反沖技術修復色譜柱收到柱效提高、柱效恢復的效果。
      一、分析氨基酸的離子交換柱,使用一段時間反柱效明顯下降,用NaOH活化,達不到要求,但用NaOH反沖活化可迅速恢復柱效。
      二、色譜柱使用一段時間后柱效下降,此時可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填滿,然后用流動相反沖一下,可使柱效恢復,因反沖可以改善柱頭死空間。
      三、因反沖可把沉積在過渡板上的細微顆粒沖走,有時也可用反沖技術使柱壓降低。
      一些反沖色譜柱的方法:
      如果是已經保存好的色譜柱:①反向接柱,先用 95 水:5 乙腈 0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;然后用四氫呋喃,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;最后用 95 乙腈:5 水,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;②正向接柱,用 65乙腈水保存色譜柱。
      如果是剛走完樣的色譜柱,那么請按照下列步驟進行:①卸掉保護柱;②正向接柱,常規方法沖洗色譜柱(先 95水,后 95 乙腈或甲醇);③反向接柱,先用 95 水:5 乙腈 0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;然后用四氫呋喃,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;最后用 95 乙腈:5 水,0.2ml/min,沖 20 倍柱體積;④正向接柱,用 65乙腈水保存色譜柱。
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